文献类型: 中文期刊
作者: 刘厚宇 1 ; 李顺雨 2 ; 吴敏芳 1 ; 乔光 1 ; 吴亚维 3 ; 宋莎 3 ;
作者机构: 1.贵州大学农业生物工程研究院/生命科学院山地植物资源保护与种质创新教育部重点实验室
2.贵州省威宁自治县果业发展中心
3.贵州省农业科学院果树科学研究所
关键词: 中国樱桃;IRAP;技术体系;优化
期刊名称: 种子
ISSN: 1001-4705
年卷期: 2020 年 009 期
页码: 31-35,40
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 基于中国樱桃LTR类反转录转座子的反转录酶(RT)序列信息设计引物,并根据扩增谱带的数量、多态性和可重复性等指标筛选IRAP-PCR引物;采用5因素4水平L16(45)的完全随机正交试验,对影响PCR体系的主要因子进行优化,建立了中国樱桃IRAP分子标记反应体系.结果表明,筛选出9条引物,可以扩增222个清晰位点,位点的平均多态性比率为90.09%.PCR的最佳反应体系为25 μL,含2.0 mmol·L-1MgCl2、1.0 U Taq酶、0.2 mmol·L-1引物、20 ng模板DNA、0.3 mmol·L-1dNTP,采用8%聚丙烯酰胺凝胶电泳检测.
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