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牛结核杆菌DNA疫苗的纯化工艺研究及质量鉴定

文献类型: 中文期刊

作者: 宋振忠 1 ; 黄炯 1 ; 徐雪萍 2 ; 徐志光 1 ; 张云峰 2 ; 蔡宏 3 ; 许礼义 1 ; 呼西旦 1 ;

作者机构: 1.新疆畜牧科学院兽医研究所

2.新疆农垦科学院畜牧兽医研究所

3.北京大学生命科学学院

关键词: DNA疫苗;纯化;聚乙二醇;阴离子交换;质量鉴定

期刊名称: 中国畜牧兽医

ISSN: 1671-7236

年卷期: 2011 年 38 卷 04 期

页码: 186-190

收录情况: 北大核心

摘要: 为获得纯度较高,能进行动物免疫试验的DNA疫苗,在高密度发酵工程菌的基础上,通过传统的碱裂解,获得粗提的质粒;用氯化钙去除裂解液中的大部分RNA,并用Sartobran P囊式过滤器获得了澄清的溶液。用聚乙二醇法沉淀超螺旋质粒DNA,去除大部分菌体蛋白和宿主DNA。最后用source 30Q阴离子交换色谱填料去除几乎全部的内毒素并浓缩了质粒。本试验纯化的DNA疫苗经质量检验达到了转染动物的要求。该工艺实现了一步色谱纯化DNA疫苗的目的,具有工艺简单、快速的优点。

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