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甜瓜种子细菌性果斑病菌PCR检测方法的研究

文献类型： 中文期刊

作者： 李菊芬 1 ; 林涛 1 ; 马国斌 1 ;

作者机构： 1.上海市农业科学院设施园艺研究所

关键词： 甜瓜种子;细菌性果斑病;PCR检测

期刊名称： 上海农业学报

ISSN： 1000-3924

年卷期： 2020 年 002 期

页码： 77-81

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 以携带细菌性果斑病菌(Acidovoras avenae subsp. citrulli)的甜瓜种子为材料,比较了不同引物、不同种子处理方式、不同浸提液及不同提取时间对细菌性果斑病菌PCR及实时荧光定量PCR检测结果的影响.结果表明:以完整带菌种子浸提液为模板进行PCR扩增,操作最简单且特异条带亮度最高,"种壳+种仁"处理次之,而以磨碎种子浸提液为模板,未能扩增出特异条带.以无菌水作为浸提液的PCR扩增效果明显优于磷酸缓冲液和液体KB培养基,浸提时间以3-12 h为宜.实时荧光定量PCR检测结果与普通PCR一致.在3对特异引物中,引物BX-L1/BX-S-R2的普通PCR扩增效果最佳,引物SEQID4m/SEQID5更适用于实时荧光定量PCR检测.

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