文献类型： 中文期刊
作者： 赵密 1 ; 朱新平 1 ; 史燕 1 ; 高明英 1 ;
作者机构： 1.中国水产科学研究院珠江水产研究所
关键词： 黄喉拟水龟;黏质沙雷氏菌;SMART全长cDNA文库;基因鉴定
期刊名称： 华中农业大学学报
ISSN： 1000-2421
年卷期： 2011 年 30 卷 01 期
页码： 105-110
收录情况： 北大核心 ; CSCD
摘要： 以致病黏质沙雷氏菌人工感染的黄喉拟水龟肝组织为材料,应用SMART(switching mechanism at 5’end of RNA transcript)技术,构建了黄喉拟水龟的全长cDNA文库。首先用SMARTTM PCR cDNA systhesis kit合成全长的双链cDNA,通过琼脂糖凝胶分级分离技术切除小片段的cDNA,将大于500 bp的cDNA连接到pGEM-T载体中,电转化到J M109感受态细胞。在构建好的文库中,经测定,文库约含有1.8×105个重组子,重组效率达90%,插入片段多在0.5～3.0 kb之间。对库中长度约为1 000 bp的80个基因进行了测序,结果显示大部分首次在龟类发现。测序鉴定的基因包括免疫相关基因9个、信号传导基因6个、催化酶类基因8个、糖代谢相关基因2个、转运相关基因1个、结构基因2个。
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