文献类型： 中文期刊

作者： 周云昊 ¹ ; 李小冬 ¹ ; 宋莉 ¹ ; 尚以顺 ¹ ; 刘凤丹 ¹ ; 裴成江 ¹ ; 李世歌 ¹ ; 刘军林 ¹ ;

作者机构： 1.贵州省农业科学院/贵州省草业研究所

关键词： 纤维素降解菌;金针菇菌糠;分离;纤维素降解酶活性;分析

期刊名称： 畜牧与饲料科学

ISSN： 1672-5190

年卷期： 2023 年 44 卷 006 期

页码： 31-40

摘要： [目的]分离筛选金针菇菌糠来源的纤维素降解菌,研究其生物学特性和所产纤维素降解酶活性,为菌糠资源的饲料化利用提供技术支撑.[方法]采用稀释涂布法接种金针菇菌糠样品,采用硝酸纤维素钠培养基进行纤维素降解菌的分离培养,利用刚果红培养基初步分析分离菌株的纤维素降解能力;通过 16S rDNA测序分析和生物安全性预测挑选候选菌株,然后进行生理生化特性分析、不同温度下生长曲线测定以及纤维素降解酶活性动态分析.[结果]样品经硝酸纤维素钠培养基筛选培养后获得30 个独立菌落,所有菌株在刚果红培养基上都能形成明显的透明圈,部分菌株具有较强的纤维素降解能力.16S rDNA测序分析显示,30 株分离菌被鉴定为韩国假单胞杆菌、明斯特小陌生菌、深红沙雷菌等 9 个菌种;结合生物安全性预测及纤维素降解能力初筛结果,选取韩国假单胞菌(Pseudomonas koreensis,编号:JK-32)、明斯特小陌生菌(Advenella mimigardefordensis,编号:JK-52)、深红沙雷菌(Serratia rubidaea,编号:JK-56)、马葡萄球菌(Staphylococcus equorum,编号:JK-57)、腐生葡萄球菌(Staphylococcus saprophytics,编号:JK-62)、黏质沙雷菌(Serratia marcescens,编号:JK-66)作为候选菌株开展后续试验.生理生化特性分析结果显示,6 株候选菌株接触酶活性试验均为阳性,甲基红试验和二乙酰试验均为阴性.JK-62 株的生长受温度影响较小,细菌生长速率和最终细菌浓度在所有候选菌株中表现较好;JK-56 株在温度较低(28~34℃)的培养条件下,生长速率和最终细菌浓度均低于其他候选菌株,而当培养温度上升到 40℃时,其生长速率与其他菌株相近,并且最终细菌浓度较高.在培养第 1~7 天,JK-56 株的内切葡聚糖酶活性在所有菌株中均最高;在培养第 2、4、5 天,JK-66 株的内切葡聚糖酶活性显著(P<0.05)高于CK菌株.JK-66 株的外切葡聚糖酶活性较高,在不同检测时间点均显著(P<0.05)高于CK菌株;在培养第 2~4 天,JK-56 株的外切葡聚糖酶活性显著(P<0.05)高于CK 菌株.JK-66 株的β-葡萄糖苷酶活性在候选菌株中表现较好;在培养第 3~7 天,JK-56 株的β-葡萄糖苷酶活性在候选菌株中仅次于JK-62 株和JK-66 株.在培养第 2~5 天,JK-56 株的滤纸酶活性在候选菌株中最高,在培养第 5 天时显著(P<0.05)高于CK菌株,在此期间,JK-66 株的滤纸酶活性也处于较高水平.[结论]深红沙雷菌JK-56 株和黏质沙雷菌JK-66 株纤维素降解酶活性整体水平较高,且内切葡聚糖酶和外切葡聚糖酶活性表现突出,可以与具有较强β-葡萄糖苷酶活性的菌种配合成复合菌系应用于金针菇菌糠饲料化开发利用.