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大花萱草ISSR-PCR最佳反应体系的建立

文献类型: 中文期刊

作者: 曹冬梅 1 ; 康黎芳 1 ; 赵艳 1 ; 张超 1 ; 段九菊 1 ; 王云山 1 ;

作者机构: 1.山西省农业科学院园艺研究所

关键词: 大花萱草;ISSR;最佳反应体系

期刊名称: 山西农业科学

ISSN: 1002-2481

年卷期: 2011 年 39 卷 12 期

页码: 1239-1242

摘要: ISSR标记能揭示出种间、种内遗传变异情况,更好地揭示亲缘关系和遗传多样性。以大花萱草的5个品种为试材,研究了影响大花萱草ISSR-PCR扩增效果的各项因素,建立了适合大花萱草ISSR-PCR的最佳反应体系:20μL反应体系中,10×buffer 2μL,dNTP 0.2 mmol/L,Mg2+浓度1.5 mmol/L,引物浓度0.5 mmol/L,Taq酶10.002 nkat,DNA模板20 ng。大花萱草的最佳ISSR扩增反应程序为:94℃预变性5 min;94℃变性40 s,50℃退火45 s,72℃延伸1.5 min,共40个循环;最后72℃延伸10 min。通过该反应程序进行的大花萱草ISSR扩增可获得清晰、稳定的条带。

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