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马齿苋PoFAD6基因克隆、原核表达及对低温胁迫的响应

文献类型: 中文期刊

作者: 周麟笔 1 ; 韩洪强 2 ; 王彪 2 ; 赵大芹 1 ; 马关鹏 1 ; 刘峰 3 ; 文林宏 1 ;

作者机构: 1.贵州省园艺研究所

2.贵州民族大学民族医药学院

3.宁波城市职业技术学院景观生态学院

关键词: 马齿苋;ω-6脂肪酸脱氢酶;原核表达;低温胁迫

期刊名称: 种子

ISSN: 1001-4705

年卷期: 2023 年 010 期

页码: 1-7,15

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 本研究以马齿苋为材料,采用同源克隆获得马齿苋ω-6脂肪酸脱氢酶PoFAD6基因,并对其进行了生物信息学分析、原核表达及在低温胁迫下的表达研究。结果表明,PoFAD6基因CDS全长为1 380 bp,推导编码459个氨基酸,其氨基酸序列具有Membrane-FADS-like超家族共同的保守结构域。PoFAD6蛋白N端无信号肽,具有4个跨膜结构,为不稳定亲水蛋白,亚细胞预测定位于叶绿体上,二级结构主要包括α-螺旋和不规则卷曲。氨基酸同源比对和系统发育树分析结果表明,PoFAD6与藜麦FAD6氨基酸序列一致性最高,为77.54%,亲缘关系最近。PoFAD6融合蛋白可在大肠杆菌BL21表达宿主中成功表达,分子量约为53 kD。RT-qPCR结果表明,5℃低温处理0~24 h,PoFAD6基因的表达模式呈先升后降的趋势,说明PoFAD6基因能响应低温胁迫。

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