文献类型： 中文期刊
作者： 柳明 1 ; 喻达辉 2 ; 黄桂菊 3 ;
作者机构： 1.农业部海水养殖生态与质量控制重点开放实验室
2.中国水产科学研究院南海水产研究所
3.上海海洋大学水产与生命学院
关键词： 大珠母贝(Pinctada maxima);磁珠富集法;微卫星;遗传多样性
期刊名称： 海洋科学
ISSN： 1000-3096
年卷期： 2010 年 34 卷 08 期
页码： 1-5+22
收录情况： 北大核心 ; CSCD
摘要： 采用生物素标记的(CA)15探针和磁珠富集法构建了大珠母贝(Pinctada maxima)微卫星DNA文库,随机挑选1200个菌落,经PCR筛选得到298个候选克隆,成功测序246个,分析获得251个微卫星序列,其中完美型、非完美型和混合型分别占63%、32%和5%。除探针中使用的CA重复外,还得到AT、GT、TC、AG、GC、TAA、CAA、AGG、GATA、GACA、GTGC、CGTC、GACG、CTGT等重复序列。设计引物90对,挑选其中30对合成并筛选出21对能在大珠母贝基因组有效扩增的引物。种群PCR扩增后利用变性聚丙烯酰胺凝胶电泳法进行检测,获得了10个多态位点,共检测出59个等位基因,片段长度范围为133~444 bp。各位点等位基因数2~8个,平均等位基因数5.9个;有效等位基因数为1.342 3~6.000 0,平均为4.124 0;多态性信息含量(CPI)为0.222 5~0.811 8,平均0.7179;期望杂合度(He)为0.259 3~0.847 5,平均0.717 9;观测杂合度(Ho)为0.300 0~0.800 0,平均0.533 3。这些微卫星多态性标记的获得,为进一步开展大珠母贝遗传育种、保护生物学和种群遗传多样性等研究奠定了一定基础。
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