文献类型： 中文期刊
作者： 周小愿 1 ; 张星朗 1 ; 贾秋红 1 ; 韩亚慧 1 ; 高宏伟 1 ;
作者机构： 1.中国水产科学研究院黄河水产研究所
关键词： 大鲵;虹彩病毒;主要衣壳蛋白;单克隆抗体
期刊名称： 水产学报
ISSN： 1000-0615
年卷期： 2016 年 40 卷 12 期
页码： 1923-1930
收录情况： 北大核心 ; CSCD
摘要： 制备抗大鲵虹彩病毒(CGSIV)MCP COE蛋白的单克隆抗体,并对其基本特性进行鉴定及开展初步应用。用纯化的重组CGSIV MCP COE蛋白免疫BALB/c小鼠,取免疫小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,间接ELISA法检测阳性孔,经有限稀释法亚克隆,筛选单克隆杂交瘤细胞株。采用间接ELISA法、免疫印迹法和单克隆抗体亚型检测试剂盒等鉴定单抗的稳定性、特异性和亚型;采用腹水诱生法制备单抗腹水,饱和硫酸铵法纯化腹水单抗;间接ELISA法分别测定单抗杂交瘤细胞上清液和腹水单抗的效价;利用间接免疫荧光法观察CGSIV的增殖。结果显示,细胞融合克隆率为98.68%,阳性率为20.52%,得到1株能够稳定分泌特异性抗体的阳性杂交瘤细胞,命名为1M6。单克隆抗体的亚型属于Ig G2b,κ链;免疫印迹法和间接ELISA法测定结果显示,单抗具有很好的特异性;杂交瘤细胞株培养上清液的效价为1∶1600,腹水单抗效价为1∶2×106,亲和常数为2×105。间接免疫荧光显示CGSIV感染EPC细胞24 h后在宿主细胞质中可以观察到成熟的病毒粒子形成的包涵体,而且在宿主细胞核内也能发现病毒粒子。抗CGSIV MCP COE蛋白单克隆抗体的成功制备为CGSIV免疫学检测方法的建立和其他相关研究的开展奠定了基础。
- 相关文献
[1]大鲵虹彩病毒TaqMan实时荧光定量PCR检测方法的建立. 周勇,曾令兵,孟彦,周群兰,张辉,高正勇,肖艺,孙建滨. 2012
[2]大口黑鲈溃疡综合征病毒MCP基因序列分析及PCR快速检测方法的建立. 马冬梅,白俊杰,邓国成,李胜杰,叶星,江小燕. 2010
[3]大鲵虹彩病毒主衣壳蛋白MCP基因DNA疫苗的构建及其免疫效果. 曾宪辉,曾令兵,周勇,范玉顶,陈倩,刘文枝,张雪萍,张琳琳. 2015
[4]大鲵虹彩病毒的PCR检测及初步应用. 沈红保,张建军,张军燕,李引娣,陈媛媛. 2012
[5]大菱鲆红体病虹彩病毒主要衣壳蛋白基因在毕赤酵母中的重组分泌表达. 吴成龙,史成银,黄倢,孔晓瑜. 2009
[6]鳜传染性脾肾坏死病毒主要衣壳蛋白基因的原核表达. 张敏,白俊杰,劳海华,叶星,简清,罗建仁. 2004
[7]大口黑鲈溃疡综合征病毒MCP基因的原核表达及重组蛋白的免疫效果初步分析. 马冬梅,邓国成,白俊杰,江小燕,曹婷婷,蔡磊. 2016
[8]第五节大菱鲆红体病虹彩病毒的PCR扩增和分子生物学分类鉴定. 史成银,王印庚,黄健,王清印. (Mis
[9]军曹鱼淋巴囊肿病毒主衣壳蛋白基因全序列分析. 付小哲,石存斌,李宁求,潘厚军,常藕琴,吴淑勤. 2007
[10]中国大菱鲆虹彩病毒主要衣壳蛋白基因的PCR扩增及序列分析. 史成银,王印庚,黄倢,王清印. 2005
[11]云斑尖塘鳢肿大细胞病毒属虹彩病毒的分离与鉴定. 王庆,曾伟伟,刘春,李凯彬,常藕琴,潘加雄,石存斌,吴淑勤. 2010
[12]虹彩病毒生物学研究现状及展望. 王广军. 2004
[13]鱼类细胞肿大虹彩病毒病研究进展. 吴成龙,孔晓瑜,史成银. 2007
[14]眼斑拟石首鱼暴发性传染病病原初步研究. 李凯彬,石存斌,李新辉,黄志斌,余德光. 2002
[15]大口黑鲈虹彩病毒病研究进展. 王庆,李凯彬,曾伟伟,刘春,石存斌,吴淑勤. 2011
[16]我国养殖大菱鲆病毒性红体病及其流行情况调查. 史成银,王印庚,秦蕾,张正,杨冰,杨少丽. 2005
[17]鱼类细胞肿大病毒属全基因组结构和蛋白功能研究进展. 贾坤同,孔晓瑜,史成银. 2009
[18]大口黑鲈虹彩病毒双重PCR检测方法的建立. 王庆,曾伟伟,刘春,马冬梅,石存斌,吴淑勤. 2013
[19]大菱鲆红体病毒的提纯和初步SDS-PAGE分析. 李向勇,李娟,黄倢. 2008
[20]大鲵虹彩病毒病灭活疫苗安全性与免疫效力研究. 索钰杰,林格,江南,李逸群,范玉顶,刘文枝,孟彦,薛明洋,曾令兵,周勇. 2021
作者其他论文 更多>>
-
红碱淖浮游动物群落结构特征及其与环境因子的关系
作者：白海锋;宋进喜;龙永清;刘刚;张星朗;袁永锋;李引娣
关键词：红碱淖;浮游动物;群落结构;水质评价;环境因子
-
黄河兰州市区段浮游动物群落结构调查及水质初步评价
作者：贾秋红;李晓春;白海锋;沈红保;问思恩
关键词：黄河兰州市区段;浮游动物;群落结构;水质评价
-
黄河兰州段浮游植物群落结构的研究
作者：白海锋;沈红保;问思恩;李瑞娇;贾秋红;余斌;陈媛媛;李晓春
关键词：黄河兰州段;浮游植物;群落结构
-
渭河陕西段浮游植物群落结构及水质评价
作者：高宏伟;李晓春;陈晓霞;侯淑敏;王博涵;白海锋;袁永锋;贾秋红
关键词：渭河陕西段;浮游植物;群落结构;水质评价
-
黄河兰州市区段秋季浮游动物群落结构特征
作者：白海锋;王丰;张星朗;袁永锋;问思恩;沈红保;李瑞娇;张军燕
关键词：黄河兰州段;浮游动物;群落结构
-
泾河陕西段春季浮游植物的群落结构特征
作者：陈媛媛;高志;余斌;张军燕;任敬;贾秋红
关键词：泾河;浮游植物;群落结构
-
黄河兰州市区段秋季大型底栖动物群落结构调查
作者：贾秋红;白海锋;袁永锋;高宏伟;李晓春;王博涵;沈红保;问思恩
关键词：黄河兰州市区段;底栖动物;群落结构
