文献类型： 中文期刊
作者： 赵曾强 1 ; 韩泽刚 1 ; 李会会 1 ; 李潇玲 1 ; 张析 1 ; 张薇 1 ;
作者机构： 1.石河子大学
关键词： 烟草;GhWRKY44;遗传转化;病程相关蛋白基因
期刊名称： 华北农学报
ISSN： 1000-7091
年卷期： 2016 年 01 期
页码： 117-122
收录情况： 北大核心 ; CSCD
摘要： 为了进一步验证GhWRKY44(登录号:KJ801807)基因在烟草异位表达后的功能,构建了Ca MV35S启动子调控、Nos为终止子的棉花抗枯萎病相关基因(GhWRKY44)的过表达载体;电击法将其导入农杆菌GV3101,菌液PCR筛选鉴定阳性菌株,采用农杆菌介导法转化烟草;T0转化植株经卡那霉素筛选、PCR检测后,随机从转基因T0中选取5株进行RT-PCR检测,均为阳性株,说明GhWRKY44基因不仅整合到烟草基因组中而且还能正常转录。对过表达GhWRKY44基因的转基因烟草T1株系进行实时荧光定量PCR(qRT-PCR)分析。结果表明,在正常生长情况下,PR5和NPR1的表达量在转GhWRKY44株系中明显增加,枯萎病菌侵染后,在转GhWRKY44株系中,PR1a、PR2和NPR1的表达量迅速增加,明显高于野生型株系,而PR5的表达量则低于野生型株系,说明该目的基因能在烟草中异位表达并能激活病程相关蛋白基因的表达,但其功能仍需进一步研究。
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