文献类型： 中文期刊

作者： 梁洪军 ¹ ; 李晶 ¹ ; 王永山 ² ; 魏德江 ¹ ; 陈琼 ¹ ; 周东明 ¹ ; 唐雨德 ¹ ;

作者机构： 1.南京军区疾病预防控制中心

2.江苏省农业科学院兽医所

关键词： 沙门菌;荧光定量PCR;检测

期刊名称： 东南国防医药

ISSN： 1672-271X

年卷期： 2013 年 003 期

页码： 215-218

摘要： 目的应用荧光定量PCR技术检测食品中沙门菌,为病原监测和快速诊断提供实验依据.方法选择沙门菌invA基因设计引物,应用SYBRGreen I染料建立荧光定量PCR法.分别对61株沙门菌、14株非沙门菌以及食品模拟标本、市售禽蛋制品进行检测,观察方法的特异性、敏感性和可行性.结果建立的荧光定量PCR法检测所有沙门菌均出现了特异的熔解曲线,扩增产物的熔点值79.6℃左右;目标菌DNA的扩增产物循环数(Ct值)为20,空白对照及非沙门菌的Ct值大于30,非沙门菌均未出现特异的熔解曲线.每反应最低检测的沙门菌数是31 CFU;对食品中人工污染的沙门菌的检测,最低检测量是1 CFU,检测时间为7~8 h,与培养法比较,阳性符合率100%;对市售的369份禽蛋制品进行检测,阳性结果 19份,而细菌培养法检测阳性结果为12份.结论基于SYBRGreen I染料建立的荧光定量PCR检测沙门菌是敏感、特异、省时、省力的方法,适用于沙门菌快速检测.