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甘蓝型油菜Δ~(12)-油酸去饱和酶基因RNAi载体的构建

文献类型： 中文期刊

作者： 梁会娟 1 ; 苗丽娟 2 ; 曹刚强 1 ; 田保明 1 ; 陈占宽 2 ;

作者机构： 1.郑州大学生物工程系

2.河南省农业科学院生物技术研究所

关键词： 油菜;油酸;fad2;RNAi;载体构建

期刊名称： 河南农业科学

ISSN： 1004-3268

年卷期： 2006 年 35 卷 06 期

页码： 38-43+48

收录情况： 北大核心

摘要： 通过基因工程手段抑制甘蓝型油菜Δ12-油酸去饱和酶(delta-12 oleate desaturase FAD2)基因的表达,从而使油酸脱饱和产生亚油酸的步骤受阻,达到富集油酸,减少多不饱和脂肪酸含量的最终目的。依据植物RNA干扰的原理和研究中用于构建RNAi载体的基本经验,选择油菜fad2基因片段(510bp)分别以反向和正向的形式插入到油菜napin启动子下游,并在反向和正向插入的基因片段之间即间隔区导入1个来源于豌豆的rbcS-3C基因内含子(83bp)及其剪切位点之前5bp、之后4bp片段。组装完成的fad2RNAi载体转入到植物双元表达载体pCAMBIA3301,植物筛选标记基因采用抗灭生性除草剂PPT的选择基因bar及报告基因gus,从而构建成以甘蓝型油菜fad2基因为靶标的RNAi植物表达载体pCAMBIA3301-fad2i。

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