文献类型： 中文期刊

作者： 雒瑞瑞 ¹ ; 齐兴财 ² ; 刘子龙 ² ; 李讨讨 ² ; 王彩莲 ¹ ; 郎侠 ¹ ; 宋淑珍 ¹ ;

作者机构： 1.甘肃省农业科学院畜草与绿色农业研究所

2.甘肃农业大学动物科学技术学院

关键词： 藏绵羊;PFKM基因;克隆;生物信息学分析;组织表达

期刊名称： 中国草食动物科学

ISSN： 1002-6037

年卷期： 2024 年 44 卷 005 期

页码： 1-10

摘要： 本研究旨在分析藏绵羊PFKM的序列特征、生物信息学及其在不同发育阶段(1日龄、3月龄、1岁龄和3岁龄)肌肉组织中的表达模式.以成年(3岁龄)藏绵羊的背最长肌cDNA为模板,克隆PFKM基因的编码区序列,并进行生物信息学分析.利用实时荧光定量(RT-qPCR)技术检测PFKM基因在背最长肌、心肌、冈上肌、肱二头肌、肺脏、肝脏、脾脏和肾脏中的表达情况,并检测不同发育阶段上述组织中PFKM mRNA表达水平的变化.同时,用Western Blot检测不同年龄阶段藏绵羊背最长肌中PFKM蛋白的表达水平.结果表明,藏绵羊PFKM基因的CDS区全长2 556 bp,共编码851个氨基酸,与绵羊参考序列相比存在19个突变位点,与绵羊(98.82%)和山羊(98.59%)具有较近的亲缘关系;预测PFKM蛋白为亲水性蛋白,不存在信号肽,主要分布在细胞质中,蛋白的二级结构以α-螺旋为主,PFKM蛋白与10个糖酵解相关蛋白质分子间存在潜在的相互作用;RT-qPCR结果显示,随着年龄的增加,PFKM mRNA在藏绵羊各组织中基本呈现先上升后下降(1日龄<3月龄<1岁龄>3岁龄)的表达趋势,背最长肌中PFKM蛋白的表达也先上调后下调.本研究获得了藏绵羊PFKM基因完整的CDS区,发现其在物种间的保守性较高,并在藏绵羊肌肉生长发育过程中发挥重要的作用.