文献类型： 中文期刊

作者： 王筱翔 ¹ ; 林庆胜 ² ; 尹飞 ² ; 胡珍娣 ² ; 陈焕瑜 ² ; 沈斌斌 ¹ ; 陈小帆 ³ ; 冯夏 ² ;

作者机构： 1.华南农业大学资源环境学院

2.广东省农业科学院植物保护研究所/广东省植物保护新技术重点实验室

3.广东出入境检验检疫局

关键词： 小菜蛾;蛋白质;提取;蛋白质组学;聚丙烯酰胺凝胶电泳

期刊名称： 环境昆虫学报

ISSN： 1674-0858

年卷期： 2015 年 37 卷 01 期

页码： 56-60

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 建立适用于小菜蛾蛋白质组学研究的样品前处理方法。应用SDS-PAGE电泳比较分析了TCA-丙酮沉淀,Tris-饱和酚抽提,RIPA Lysis Buffer和I-PER Reagent直接裂解4种方法对小菜蛾幼虫总蛋白的抽提质量。结果显示:4种方法对小菜蛾全蛋白的提取率差异比较显著,其中RIPA Lysis Buffer和I-PER Reagent两种直接裂解法蛋白提取率最高,分别为52.06 mg/g和46.16 mg/g;TCA-丙酮沉淀法提取率适中,为34.58 mg/g;Tris-饱和酚抽提法提取率最低,为27.39 mg/g。SDS-PAGE电泳分析表明,Tris-饱和酚抽提法蛋白谱条带分辨率最高,蛋白条带最多,为32条,在17.0 k Da-245 k Da的范围内分布均匀;TCA-丙酮沉淀法蛋白谱带数目为30条,条带清晰,分辨率较高,但缺失部分蛋白;RIPA Lysis Buffer和I-PER Reagent两种直接裂解法蛋白谱条带数目较少,小分子蛋白条带丢失或不明显。根据蛋白提取率和条带的数量综合分析,TCA-丙酮沉淀法适用于小菜蛾蛋白质组学的样品前处理。