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蚕豆萎蔫病毒2的RT-LAMP检测方法的建立

文献类型: 中文期刊

作者: 秦艳红 1 ; 王凤丽 1 ; 张重义 2 ; 刘红彦 1 ; 刘玉霞 1 ; 高素霞 1 ; 文艺 1 ; 李绍建 1 ; 刘永康 3 ; 张德胜 1 ; 鲁书豪 1 ; 赵正伟 3 ; 王飞 1 ; 鲁传涛 1 ;

作者机构: 1.河南省农业科学院植物保护研究所

2.福建农林大学

3.温县农业科学研究所

关键词: 山药和地黄;蚕豆萎蔫病毒2;逆转录环介导恒温扩增;快速检测

期刊名称: 植物病理学报

ISSN: 0412-0914

年卷期: 2024 年 54 卷 006 期

页码: 1236-1243

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 蚕豆萎蔫病毒2(broad bean wilt virus 2,BBWV 2)属于蚕豆病毒属(Fabavirus),是地黄和山药上的重要病毒之一,严重影响这些中药材的产量和品质。本研究建立了BBWV 2的环介导恒温扩增(reverse transcription loop-mediated isothermal amplification, RT-LAMP)检测方法。根据BBWV 2基因组RNA2上的小外壳蛋白(small coat protein, SCP)基因序列的保守区设计引物,对RT-LAMP的反应温度和时间进行了优化,最佳反应条件为60~65℃反应60 min对其灵敏度、特异性和准确性进行了检测,RT-LAMP方法的灵敏度是常规PCR的10倍,为6.47×10~3拷贝·μL-1,可特异地检测出BBWV 2,对田间地黄、白术和白芷检测的准确性高于常规PCR,对山药检测的准确性度与常规PCR一致。本研究建立的RT-LAMP是一种特异、灵敏、快速、方便的BBWV 2检测方法,适用于基层科研单位对该病毒的准确检测和诊断。

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