文献类型： 中文期刊

作者： 丰秀静 ¹ ; 曹少先 ¹ ; 孟春花 ¹ ; 王慧利 ¹ ; 钱勇 ¹ ; 王锋 ² ; 成勇 ³ ;

作者机构： 1.江苏省农业科学院畜牧研究所

2.南京农业大学动物科技学院

3.扬州大学兽医学院

关键词： 山羊胎儿成纤维细胞;转染效率;脂质体;绿色荧光蛋白

期刊名称： 江苏农业学报

ISSN： 1000-4440

年卷期： 2011 年 27 卷 03 期

页码： 106-110

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 探讨获得外源基因高效转染山羊胎儿成纤维细胞(gFFCs)的方法,为筛选出体细胞核移植的供核细胞,制备转基因山羊提供技术基础。该研究以绿色荧光蛋白基因(GFP)为报告基因,采用脂质体LipofectaminTM LTX+PLUSTMReagent介导,对细胞接种量、质粒DNA用量、脂质体与质粒DNA比例、脂质体-DNA复合物与细胞作用时间进行优化,荧光显微镜下统计转染后24 h的转染效率。结果显示:在24孔培养板中,每孔接种细胞6×104个,24 h后进行转染,质粒DNA每孔0.6μg,脂质体与质粒DNA比例为4.5∶1.0,脂质体-DNA复合物与细胞作用时间为6 h时,转染效率最高,达到81.2%。