文献类型： 中文期刊

作者： 王玮 ¹ ; 谭书萍 ¹ ; 黄平 ¹ ; 国果 ¹ ; 修江帆 ² ; 尚小丽 ¹ ; 张昌容 ³ ;

作者机构： 1.贵州省感染免疫与抗体工程特色实验室

2.贵州医科大学 基础医学院现代病原生物学特色实验室

3.贵州省生物技术研究所

关键词： 家蝇;丝氨酸蛋白酶抑制剂2;酶学活性;酶稳定性

期刊名称： 贵州农业科学

ISSN： 1001-3601

年卷期： 2025 年 53 卷 008 期

页码： 77-82

收录情况： 北大核心

摘要： [目的]探明家蝇丝氨酸蛋白酶抑制剂Serpin2重组蛋白在体外的酶学活性和稳定性,为重组蛋白酶的体外应用和功能研究提供科学依据.[方法]以FITC-Casein作为底物,与常见的丝氨酸蛋白酶即胰蛋白酶(Trypsin)、蛋白酶K(Proteinase K)、枯草杆菌蛋白酶(Subtilisin)、胰凝乳蛋白酶(Chymotrypsin)及纯化的家蝇Serpin2重组蛋白共同孵育,使用荧光多功能酶标仪检测荧光强度并计算剩余酶活,分析Serpin2重组蛋白对 4种丝氨酸蛋白酶的体外抑制活性;分别设置不同温度、不同缓冲液pH和不同放置时间处理重组蛋白,检测荧光强度并计算剩余酶活,分析环境因素对家蝇Serpin2重组蛋白稳定性的影响.[结果]加入 25 μL浓度为 1 mg/mL的Serpin2重组蛋白对胰蛋白酶有极显著的抑制作用,且Serpin2重组蛋白在30℃、缓冲液pH为 7、处理 15 min后稳定性较强,此时重组蛋白对胰蛋白酶的抑制活性均大于 90.00%.[结论]家蝇Serpin2重组蛋白具有显著丝氨酸蛋白酶——胰蛋白酶类抑制活性,且在一般条件下具有较高的环境稳定性.