文献类型： 中文期刊

作者： 王蔚芳 ¹ ; 李青梅 ² ; 柴书军 ² ; 甘玲玲 ³ ; 洪磊 ¹ ; 郭军庆 ² ; 雷霁霖 ¹ ;

作者机构： 1.中国水产科学研究院黄海水产研究所

2.河南省农业科学院

3.四川省富顺县水产渔政局

关键词： 大菱鲆;免疫球蛋白M;单克隆抗体;BALB/C小鼠

期刊名称： 中国工程科学

ISSN： 1009-1742

年卷期： 2014 年 16 卷 09 期

页码： 16-20

收录情况： 北大核心

摘要： 应用细胞工程技术研制大菱鲆免疫球蛋白M(immunoglobulin M,IgM)的单克隆抗体并分析其免疫学特性。小鼠骨髓瘤细胞NS0与经IgM免疫的BALB/C小鼠脾细胞融合,经过反复有限稀释法克隆,筛选获得4株抗大菱鲆IgM的单克隆抗体杂交瘤细胞株,分别为B1D1、D5C2、E1B2和F4A1。经小鼠腹水扩大生产后,单抗效价为1∶1.024×106检测灵敏度为32 ng/mL。Western blot分析表明,获得的单抗与IgM重链区特异性结合。交叉结果显示,单抗与大菱鲆血清呈强阳性反应,与褐牙鲆、红鳍东方鲀、许氏平鲉、六线鱼、鲈鱼均呈微弱阳性反应,而与半滑舌鳎、鲤鱼、鲫鱼、草鱼、鳙鱼的血清无交叉反应。本研究制备的大菱鲆IgM单克隆抗体效价高、灵敏度高、特异性强,适合用于大菱鲆免疫学相关研究和生产实际应用。