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原核表达的兔出血症病毒衣壳蛋白对兔的免疫保护效果

文献类型: 中文期刊

作者: 王永山 1 ; 陆承平 1 ; 周宗安 2 ; 薛家宾 3 ;

作者机构: 1.南京农业大学农业部动物疫病诊断和免疫重点实验室

2.华东医学生物技术研究所

3.江苏省农业科学院兽医研究所

关键词: 兔出血症病毒;重组衣壳蛋白(VP60);免疫试验

期刊名称: 中国农业科学

ISSN: 0578-1752

年卷期: 2004 年 37 卷 11 期

页码: 1677-1681

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 为了检验大肠杆菌表达的兔出血症病毒(RHDV)衣壳蛋白(VP60)对兔的免疫保护效果,将34只清洁兔随机分成3组:单用免疫佐剂对照组(8只)、单用重组VP60组(8只)和重组VP60加免疫佐剂组(18只),分别经皮下注射,VP60的免疫剂量为每只每次400μg,免疫2次,间隔7d。在第2次免疫7d后,VP60加免疫佐剂组的兔血清抗体水平显著高于单用VP60免疫组(ELISA1∶64000对比1∶4000/HI1∶128对比1∶16),表明免疫佐剂可明显加速重组VP60诱导抗体产生的进程,用RHDVNJ85强毒攻击,免疫佐剂对照组与单用VP60免疫组的实验兔均全部死亡(8/8和8/8),VP60加免疫佐剂组均全部存活,保护率为100%(18/18)。用RHDV血凝试验(HA)检测,死亡兔的肝脏组织液HA效价大于1∶512,而存活兔的肝脏组织液HA效价小于1∶2,肝脏组织触(涂)片检查和细菌培养均为阴性,证明病死兔系RHDV感染所致。用RHD重组亚单位疫苗在养兔场进行800只兔的田间免疫试验,安全有效,没有出现不良反应。对重组菌进行冻存、复苏、培养、诱导表达和质粒酶切分析,证明VP60基因在宿主菌内保持稳定。

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