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草鱼肝细胞原代培养的培养基选择与优化

文献类型: 中文期刊

作者: 张洪玉 1 ; 王海波 1 ; 赵明军 1 ; 吕永辉 1 ; 胡鲲 1 ; 杨先乐 1 ; 夏磊 1 ;

作者机构: 1.中国水产科学研究院;中国水产科学研究院无公害渔药创制中心;上海海洋大学水产与生命学院;北京鑫洋水产高新技术有限公司;北京市房山区水产技术推广站

关键词: 草鱼;肝细胞;原代培养;培养基;细胞活力

期刊名称: 中国渔业质量与标准

ISSN: 2095-1833

年卷期: 2017 年 06 期

页码: 36-41

摘要: 为寻找适宜培养草鱼原代肝细胞的培养基,本研究运用倒置相差显微镜形态学观察和CCK-8细胞活力实验,比较研究了DMEM/F12、α-MEM、RPMI-1640、M199和L-15 5种培养基,1μmol/L胰岛素、2 mmol/L谷氨酰胺和10μmol/L氢化可的松3种添加剂以及热灭活血清对草鱼原代肝细胞形态和活力的影响。通过形态学和活力检测观察发现α-MEM、M199和L-15均可以较好地促进草鱼原代肝细胞贴壁以及维持较长活力,其中以L-15为最优;此外,胰岛素的添加有助于细胞活力的维持,而谷氨酰胺和氢化可的松的添加以及血清灭活与否对细胞贴壁和活力维持均无显著性差别。本研究可为草鱼原代肝细胞的培养基选择提供参考,同时为草鱼生理学、环境毒理学研究乃至药物筛选提供支持。

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