文献类型： 中文期刊

作者： 柴书军 ¹ ; 杨苏珍 ¹ ; 刘运超 ¹ ; 冯华 ¹ ; 魏蔷 ¹ ; 王方雨 ¹ ; 金前跃 ¹ ; 张改平 ² ;

作者机构： 1.河南省农业科学院

2.河南省农业科学院动物免疫学重点实验室

关键词： 猪细小病毒4型;单克隆抗体;抗原表位

期刊名称： 畜牧与兽医

ISSN： 0529-5130

年卷期： 2024 年 008 期

页码： 77-84

收录情况： 北大核心

摘要： 为了制备猪细小病毒（PPV）4型Cap蛋白单克隆抗体（mAb）并鉴定其抗原表位，试验采用原核表达的Cap重组蛋白免疫BALB/c小鼠，将其脾细胞与SP2/0细胞进行融合，通过酶联免疫吸附测定（ELISA）、血凝抑制（HI）和免疫过氧化物酶单层细胞试验（IPMA）筛选阳性克隆，最终获得2E7、4D6和5C9这3株特异性杂交瘤细胞株；然后用mAb对Cap蛋白多肽进行ELISA检测，鉴定分析其抗原表位。结果显示：4D6和5C9 mAb识别表位为线性表位，分别为 ³⁸⁷RRQDN³⁹¹和⁵⁷⁸QRKE⁵⁸¹,而2E7 mAb识别的表位为构象表位；通过对Cap蛋白3D结构定位分析，³⁸⁷RRQDN³⁹¹和⁵⁷⁸QRKE⁵⁸¹抗原表位位于蛋白表面，且在PPV4亚型中高度保守，而与猪瘟病毒（CSFV）、猪伪狂犬病病毒（PRV）、猪圆环病毒2型（PCV-2）、猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）、猪乙型脑炎病毒（JEV）和猪博卡病毒（PBoV）基因序列同源性低。本研究为PPV4诊断试剂的开发和新型疫苗的研制提供了参考。