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利用CRISPR/Cas9技术靶向编辑水稻基因

文献类型： 中文期刊

作者： 原文霞 1 ; 王栩鸣 1 ; 李冬月 1 ; 周洁 1 ; 严成其 1 ; 陈剑平 1 ;

作者机构： 1.浙江师范大学化学与生命科学学院;浙江省农业科学院病毒学与生物技术研究所浙江省有害生物防控国家重点实验室培育基地农业部植保生物技术重点实验室浙江省植物病毒重点实验室;云南农业大学植物保护学院

关键词： 水稻;CRISPR/Cas9;D3基因;基因编辑

期刊名称： 浙江农业学报

ISSN： 1004-1524

年卷期： 2017 年 29 卷 05 期

页码： 685-693

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 以现有水稻CRISPR/Cas9载体系统为起点,优化改造了相应的载体及其构建方法,实现了两步法构建基因敲除载体。利用新的载体和方法,针对水稻日本晴(Oryza sativa L.spp.Japonica cv.Nipponbare)D3基因的3个靶向位点分别构建了相应的CRISPR/Cas9载体,并通过农杆菌介导的遗传转化成功获得一系列转基因植株。T_0代转基因植株靶位点测序结果显示,靶位点DDRC1包括5种突变类型,植株的突变率为35.48%;靶位点DDRC2包括5种突变类型,植株的突变率为25.00%;靶位点DDRC3包括1种突变类型,植株的突变率为20.00%。利用T_1代纯合突变植株,进一步研究了所得纯合突变体的株高、分蘖数表型与CRISPR/Cas9编辑后基因型之间的关系,探讨了CRISPR/Cas9系统的基因编辑效率、位置效应和突变类型等特点,为进一步利用CRISPR/Cas9系统发展具有不同农艺性状的水稻种质材料提供了参考。

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