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山羊副流感病毒3型通过Caspase途径诱导气管上皮细胞凋亡

文献类型： 中文期刊

作者： 廖政 1 ; 李基棕 2 ; 肖芳 2 ; 钟纯燕 2 ; 杨蕾蕾 2 ; 毛立 2 ; 李文良 2 ; 孙敏 2 ; 主性 3 ; 嵇辛勤 3 ; 张纹纹 2 ; 刘茂军 2 ;

作者机构： 1.江苏省农业科学院兽医研究所兽医诊断检测重点实验室农业部兽用生物制品工程技术重点实验室

2.江苏省农业科学院兽医研究所

3.贵州大学动物科学学院

关键词： 山羊副流感病毒3型;细胞凋亡;气管上皮细胞;Caspase

期刊名称： 畜牧兽医学报

ISSN： 0366-6964

年卷期： 2019 年 010 期

页码： 2061-2069

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 旨在揭示山羊副流感病毒3型(CPIV3)感染气管上皮细胞后是否可诱导细胞发生凋亡,并对细胞凋亡的信号通路进行初步探究.本研究将CPIV3病毒液接种气管上皮细胞,在12、24、36、48、72和96 h收集培养物上清检测病毒增殖滴度;通过形态学观察CPIV3诱导气管上皮细胞病变(CPE)情况;采用Annexin V-FITC/PI双染细胞凋亡检测试剂盒和Caspase-3、Caspase-8和Caspase-9活性检测试剂盒检测凋亡水平及相关指标;荧光定量PCR检测细胞凋亡分子mRNA表达水平;Western blot分析激活型Caspase-3蛋白表达变化情况.结果显示,CPIV3在气管上皮细胞中的增殖呈上升趋势,96 h能达到104.50TCID50·mL-1;形态学观察发现,病毒接种后48 h出现细胞收缩变圆、脱落等CPE现象;流式细胞术检测及Caspase活性检测表明,感染组细胞出现细胞凋亡,48 h后细胞凋亡率达19.66%,且Caspase-3、Caspase-8和Caspase-9活性随着时间延长逐渐升高;死亡受体凋亡途径和线粒体凋亡途径细胞凋亡因子mRNA表达上调.Western blot分析揭示,激活型Caspase-3蛋白在病毒感染过程中被活化.本研究证实CPIV3感染可诱导气管上皮细胞凋亡,且Caspase途径在病毒诱导细胞凋亡的过程中发挥重要作用.

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