文献类型: 中文期刊
作者: 余厚美 1 ; 王琴飞 1 ; 林立铭 1 ; 韦卓文 1 ; 徐缓 1 ; 张振文 1 ;
作者机构: 1.中国热带农业科学院热带作物品种资源研究所国家薯类加工技术研发分中心
关键词: 酶联免疫吸附测定;抗原-抗体;反应条件
期刊名称: 食品安全质量检测学报
ISSN: 2095-0381
年卷期: 2022 年 019 期
页码: 6399-6408
收录情况: 北大核心
摘要: 目的 探索酶联免疫吸附测定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)反应中反应条件对抗原(antigen, Ag)与抗体(antibody, Ab)结合的影响。方法 以黄曲霉毒素B1 (aflatoxin B1, AFB1)抗原抗体为主要研究对象,通过分析ELISA中包被方法、包被液、离子浓度、pH、时间、温度、终止液等不同反应条件下的吸光度值(optical density, OD)和抑制率等指标,了解反应过程中抗原与抗体结合的差异情况,讨论反应条件对抗原-抗体结合的影响。结果 两步包被抗体法效价高、抑制率好,包被液用pH 7.0、0.10 mol/L的磷酸氢二钠-磷酸二氢钾抑制率高,封闭时间影响较小,25℃反应更适合操作,辣根过氧化物酶(horseradish peroxidase,HRP)标记抗原稀释液离子浓度0.020 mol/L pH=7.0时抗原-抗体结合最好,用盐酸比硫酸作为终止液更稳定。结论 包被方法、包被液、离子浓度、pH、时间、温度、终止液等条件,均是影响抗原-抗体结合的因素。
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