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鹅基因组微卫星富集文库的构建与分析

文献类型: 中文期刊

作者: 李进军 1 ; 沈军达 1 ; 陶争荣 1 ; 李国勤 1 ; 田勇 1 ; 王德前 1 ; 陈黎 1 ; 沈建良 2 ; 卢立志 1 ;

作者机构: 1.浙江省农业科学院畜牧兽医研究所

2.浙江卓旺农业科技有限公司

关键词: 鹅;微卫星;富集文库;序列分析

期刊名称: 中国草食动物科学

ISSN: 1007-9726

年卷期: 2012 年 32 卷 02 期

页码: 7-10

摘要: 为分离鹅(Anser cygnoides)微卫星序列片段,提取鹅基因组DNA,用Hae III和Rsa I内切酶消化并连接接头,再用接头特异引物进行PCR扩增。扩增产物与生物素标记的(AC)12探针杂交,杂交复合物用链霉亲和素包裹磁珠进行结合,得到单链DNA目标片段。再经PCR扩增,连接pMD19-T载体,转化入感受态大肠杆菌,得到微卫星富集小插入片段DNA文库。用Colony-PCR法筛选获得318个阳性克隆,并进行测序分析。结果表明,所测的318个序列有242个含微卫星序列,197个为有效微卫星序列,其中完全型(perfect)占60.9%,非完全型(imperfect)20.8%,混合型(compound)18.2%。(CA)n重复最为常见。文章为鹅种资源遗传多样性、分子进化、遗传图谱的构建及重要经济性状基因座定位等研究奠定了基础。

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