文献类型： 中文期刊

作者： 汪宏才 ¹ ; 商雨 ¹ ; 马瑶 ¹ ; 曾哲 ¹ ; 张蓉蓉 ¹ ; 姚伦 ¹ ; 罗玲 ¹ ; 李丽 ¹ ; 温国元 ¹ ; 罗青平 ¹ ;

作者机构： 1.湖北省农业科学院

关键词： 水禽细小病毒;检测方法;SYBR;GreenⅠ;荧光定量PCR

期刊名称： 湖北农业科学

ISSN： 0439-8114

年卷期： 2024 年 006 期

页码： 218-222

收录情况： 北大核心

摘要： 为了建立水禽细小病毒(WPV)快速检测方法,根据序列比对结果在水禽细小病毒NS基因SF3保守区域内设计特异性引物,建立SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR通用检测方法.该方法的扩增效率(E)为90.0%,相关系数(R~2)=0.99,标准曲线方程为y=-3.607x+38.77;除WPV出现S形扩增曲线外,新城疫病毒(NDV)、H9亚型禽流感病毒(H9 AIV)、鸭坦布苏病毒(DTMUV)、鸭肝炎病毒(DHAV)、鸭肠炎病毒(DEV)、鸭呼肠孤病毒(DRV)样品均未出现S形阳性扩增曲线;批内变异系数(CV)为0.15%~0.23%,批间变异系数为0.09%~0.28%.结果表明,SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR检测方法重复性好、灵敏度高和特异性强.临床样品检测结果表明,SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR与普通PCR的符合率达98.4%,灵敏度是普通PCR的1 000倍.SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR检测方法不仅能定性检测WPV,还可以进行定量检测,可用于种鸭场、种鹅场的WPV净化检测,也可用于WPV临床大量样品的快速检测.