文献类型： 中文期刊

作者： 郭静雅 ¹ ; 李杉杉 ² ; 郭强 ² ; 毛培春 ² ; 田小霞 ² ; 孟林 ² ; 杨晓盆 ² ;

作者机构： 1.北京市农林科学院北京草业与环境研究发展中心

2.北京市农林科学院北京草业与环境研究发展中心;山西农业大学

关键词： 马蔺;H+-PPase基因;序列分析;重组质粒;遗传转化

期刊名称： 分子植物育种

ISSN： 1672-416X

年卷期： 2016 年 12 期

页码： 3377-3384

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 以马蔺幼根总RNA为模板,通过RT-PCR方法扩增得到马蔺H+-PPase全长序列并克隆到p MD19-T载体,命名为Il VP。序列分析表明该基因的开放阅读框为2 316 bp,编码771个氨基酸,推测等电点为5.16,分子量为80.7 k D,所得到的序列与Gen Bank中注册的高等植物液泡膜H+-PPase的核苷酸序列相比,其同源性均达到70%以上,其氨基酸序列的同源性则达到79%以上。用SmaⅠ和SacⅠ分别对目的基因质粒和植物表达载体p BI121进行双酶切,在DNA连接酶的作用下进行定向连接,构建成植物重组质粒p BI121-35S-Il VP-Nos,再转入根癌农杆菌EHA105中,为该基因在烟草等植物中遗传转化和基因功能研究奠定基础。