文献类型： 中文期刊

作者： 于峰祥 ¹ ; 于建宁 ² ; 王公金 ¹ ; 潘伟芹 ¹ ; 徐小波 ² ; 徐志伟 ³ ; 花卫华 ³ ; 刘泉 ³ ;

作者机构： 1.南京师范大学医学分子生物学重点实验室

2.江苏省农业科学院畜牧研究所

3.江苏丘陵地区镇江农业科学研究所

关键词： 硫化物醌氧化还原酶;重组质粒;真核表达

期刊名称： 江苏农业学报

ISSN： 1000-4440

年卷期： 2011 年 27 卷 05 期

页码： 1043-1046

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 探讨SQR基因真核表达载体pcDNA3.1(-)-SQR-Myc的构建及其在真核细胞中的表达。根据已知荚膜红杆菌SQR基因序列设计5'端和3'端引物,采用PCR方法获得SQR基因,通过pMD-18T载体构建得到中间质粒pMD-18T-SQR-Myc;采用限制性内切酶XhoⅠ和KpnⅠ双酶切该中间质粒,将SQR基因插入真核表达载体pcD-NA3.1(-)相应酶切位点,获得重组质粒pcDNA3.1(-)-SQR-Myc;采用脂质体法瞬时转染HEK293细胞并进行West-ern blot蛋白鉴定。结果显示:该研究已成功构建了真核表达载体pcDNA3.1(-)-SQR-Myc,质粒测序及酶切结果完全正确,并且SQR能够在HEK293细胞系中正常表达。