文献类型： 中文期刊

作者： 刘茂军 ¹ ; 李冬梅 ¹ ; 苏国东 ¹ ; 周勇岐 ¹ ; 白方方 ¹ ; 武昱孜 ¹ ; 刘蓓蓓 ¹ ; 邵国青 ¹ ;

作者机构： 1.江苏省农业科学院兽医研究所/农业部兽用生物制品工程技术重点实验室/国家兽用生物制品工程技术研究中心;南京天邦生物科技有限公司

关键词： 猪肺炎支原体;竞争定量;PCR

期刊名称： Agricultural Science & Technology

ISSN： 1009-4229

年卷期： 2015 年 05 期

页码： 940-944

摘要： [目的]本试验旨在探索一种对猪肺炎支原体(Mycoplasma hyopneumoniae)培养物中的支原体进行快速检测的竞争定量PCR方法。[方法]设计一对Mhp特异性引物,检测Mhp培养物;又根据支原体种属保守基因序列设计一对引物,通过酶切缺失法构建竞争模板,其携带与目的片段相同的引物结合区。[结果]以一系列稀释的竞争模板的对数值为横坐标(X轴),竞争模板和目标模板扩增产物的光密度比值的校正值的对数值为纵坐标(Y轴)绘制标准曲线,根据Y=0所对应的竞争模板的量推算求得支原体的拷贝数。以变色单位的对数值为X轴,支原体的拷贝数为Y轴,绘制出标准曲线,两者之间高度相关。[结论]成功建立了一种快速测定Mhp培养物中支原体量的竞争PCR方法。