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莱茵衣藻MAPK4基因RNAi载体的构建及鉴定

文献类型： 中文期刊

作者： 王子贺 1 ; 邓晓东 2 ; 张阳 2 ; 费小雯 3 ;

作者机构： 1.海南医学院基础医学与生命科学学院;中国热带农业科学院热带生物技术研究所

2.;海南医学院基础医学与生命科学学院;中国热带农业科学院热带生物技术研究所

3.;海南医学院基础医学与生命科学学院;中国热带农业科学院热带生物技术研究所;

关键词： 莱茵衣藻;MAPK4基因;RNAi

期刊名称： 安徽农业科学

ISSN： 0517-6611

年卷期： 2017 年 19 期

页码： 126-129

摘要： [目的]构建莱茵衣藻2A38的MAPK4基因的RNAi载体。[方法]提取莱茵衣藻细胞总RNA,利用PCR扩增出编码MAPK4的基因片段,用基因工程技术将MAPK4基因片段连接载体p MD18-T上,经过2次不同的双酶切后,与RNAi中间载体p T282连接,最后连接到干涉载体p Maa7IR/XIR上,用酶切及测序鉴定MAPK4基因RNAi载体并转化莱茵衣藻。[结果]经限制性内切酶酶切及测序鉴定,证实为重组质粒,并且该重组载体可在莱茵衣藻中表达。[结论]构建的MAPK4基因RNAi载体结构正确,为进一步利用RNAi技术使MAPK4基因沉默表达,研究MAPK4在莱茵衣藻中的生物学功能奠定了试验基础。

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