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稻香相关基因OsBADH2在“吉粳88”中的基因编辑研究

文献类型： 中文期刊

作者： 周岩 1 ; 郭嘉 1 ; 胡玉锋 1 ; 魏健 1 ; 李毅丹 1 ;

作者机构： 1.长春师范大学生命科学学院;吉林省农业科学院农业生物技术研究所;吉林省农业生物技术重点实验室吉林省农业科学院;吉林师范大学生命科学学院

关键词： 基因组编辑;高分辨率溶解曲线;OsBADH2;水稻

期刊名称： 生物技术通报

ISSN： 1002-5464

年卷期： 2020 年 03 期

页码： 88-94

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 近年来稻米的香味品质受到消费市场的格外重视。水稻OsBADH2基因是影响稻米香味的重要基因,选择优质粳稻品种,针对该基因进行基因编辑,有望创制出香味品质优异的粳稻材料。本研究通过分析OsBADH2基因外显子序列的保守性,选择了3个特异性靶点,分别构建了U6启动子驱动的包含不同靶点的gRNA表达盒,并将其连入植物基因编辑表达载体。利用基因枪介导的瞬时转化体系,对非香型粳稻品种"吉粳88"进行遗传转化,T_0代共获得847株再生材料。经高分辨率溶解曲线(High Resolution Melting,HRM)分析和测序验证,24株T_0代材料的OsBADH2基因编辑靶点发生了不同类型的编辑。在T_1代材料中获得了7类不含转基因成分,且OsBADH2基因靶点纯合的基因编辑后代材料。本研究结果表明基于基因枪介导的瞬时转化体系,转化再生过程中省略了抗性筛选过程,并辅以高效的HRM检测,能够在T_1代即获得位点发生纯合编辑且无转基因成分的基因编辑后代材料。本研究获得的OsBADH2基因编辑的"吉粳88"后代材料也为培育香味品质改良的粳稻品种提供了新材料。

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