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斑点叉尾呼肠孤病毒诱导斑点叉尾肾脏组织细胞凋亡的研究

文献类型： 中文期刊

作者： 王瑶 1 ; 曾令兵 2 ; 徐进 2 ; 周勇 2 ; 肖艺 2 ;

作者机构： 1.华中农业大学水产学院

2.华中农业大学水产学院;中国水产科学研究院长江水产研究所

关键词： 斑点叉尾;呼肠孤病毒;肾脏组织细胞系;细胞凋亡

期刊名称： 水产学报

ISSN： 1000-0615

年卷期： 2013 年 37 卷 01 期

页码： 117-124

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为研究斑点叉尾呼肠孤病毒(CCRV)诱导斑点叉尾肾脏细胞(CCK)发生凋亡的机理,以CCRV感染的CCK细胞为实验材料,采用Hoechst 33258染色、DNA片段化检测、TUNEL反应、亚G1期细胞检测以及线粒体膜电位变化检测等方法进行实验。感染试验结果显示,病毒感染斑点叉尾肾脏组织细胞后,细胞变圆、皱缩,随后细胞脱落,细胞单层呈网状,感染72h后出现典型细胞病变效应(CPE);病毒感染48 h后Hoechst 33258染色结果显示,细胞的染色质固缩、核边缘化或破裂,可观察到凋亡小体,细胞凋亡率随时间增加;DNA片段化检测结果显示,病毒感染细胞12 h后细胞基因组DNA出现片段化,随后逐渐增强,72 h达到最高;TUNEL反应结果表明,病毒感染细胞72 h后细胞基因组DNA断裂,有大量游离3'末端自由羟基(-OH)存在。亚G1期细胞检测结果显示,病毒感染48 h后,约53.44%细胞处于亚G1期;利用JC-1检测试剂盒检测病毒感染细胞的线粒体膜电位变化,病毒感染细胞24 h后线粒体膜通透性发生改变,膜电位变化显著。紫外线灭活与热灭活的斑点叉尾呼肠孤病毒不能诱导斑点叉尾肾脏细胞发生凋亡,表明细胞凋亡依赖于病毒复制。

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