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原核表达dsRNA抗番木瓜畸形花叶病毒的研究

文献类型: 中文期刊

作者: 张涛 1 ; 沈文涛 2 ; 言普 2 ; 黎小瑛 2 ; 周鹏 1 ;

作者机构: 1.海南大学农学院

2.中国热带农业科学院热带生物技术研究所

关键词: 番木瓜畸形花叶病毒;原核表达;dsRNA;RNA沉默

期刊名称: 热带作物学报

ISSN: 1000-2561

年卷期: 2014 年 35 卷 07 期

页码: 1416-1423

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 番木瓜畸形花叶病毒(Papaya leaf distortion mosaic virus,PLDMV)是一种已对番木瓜种植业构成潜在威胁的新型病害,在转基因植物备受争议的背景下,利用原核表达的dsRNA来防控病毒的策略不失为一种新的选择。本文选取PLDMV CP基因全长(879 bp),运用OZ-LIC法构建了含有pdk内含子的ihpRNA结构,将其嵌入原核表达载体pSP73中,并转化RNaseⅢ缺陷型大肠杆菌M-Jm109LacY,构建了1种能高表达dsRNA的原核表达菌株M-Jm109LacY-CP879,以终浓度为0.4 mmol/L IPTG诱导后能够稳定高效的表达CP879-dsRNA。研究共设2个处理:保护性处理与治疗性处理。分别用含有CP879-dsRNA的粗提液对这2个处理的番木瓜植株进行喷施处理,通过统计发病率、观察病症变化以及ELISA分析结果表明,保护性处理能有效抑制番木瓜畸形花叶病毒的侵染,主要表现为发病时间推迟和相对较低的发病率;治疗性处理植株的病毒积累量会在喷施后第3~12天内出现暂时性的降低。结果表明,保护效果优于治疗效果,若每月喷施2~3次dsRNA粗提液,有望能够有效地预防PLDMV的侵染。

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