文献类型： 中文期刊

作者： 彭日荷 ¹ ; 熊爱生 ¹ ; 李贤 ¹ ; 范惠琴 ¹ ; 黄晓敏 ¹ ; 姚泉洪 ¹ ;

作者机构： 1.上海市农业遗传重点实验室!上海市农业科学院生物中心,上海201106,上海市农业遗传重点实验室!上海市农业科学院生物中心,上海201106,上海市农业遗传重点实验室!上海市农业科学院生物中心,上海201106,上海市农业遗传重点实验室!上海市农业科学院生物中心,上海201106,上海市农业?

关键词： 化学合成;cryIA(c)Bt;基因表达;杀虫活性

期刊名称： 生物化学与生物物理学报

ISSN： 0582-9879

年卷期： 2001 年 02 期

页码： 219-224

收录情况： SCI ; 北大核心 ; CSCD

摘要： 选用荧光假单胞菌偏爱密码 ,设计长 90bp左右的寡核苷酸引物 ,采用连续延伸PCR方法 ,合成了全长1.8kb的苏云金芽孢杆菌cryIA(c)Bt基因。合成基因消除了潜在的 polyA加尾序列、mRNA不稳定序列以及发夹结构。和Perlak[1] 发表的序列相比 ,合成的cryIA(c)Bt基因改动了 6 14个核苷酸 ,G +C的含量从 37.2 %上升到6 4%。将合成基因由tac启动子调控 ,构建成Bt表达载体 pYPBts,转化大肠杆菌后 ,在菌体内大量合成 6 6kD大小的蛋白质分子 ,其含量占菌体总蛋白质的 30 %。生物测定结果表明 ,表达的蛋白质对菜青虫三龄幼虫有很高的杀灭活性 ,LD50 为 0 .0 2 4μg/cm2 。