文献类型： 中文期刊
作者： 曲疆奇 1 ; 苏胜彦 2 ; 董在杰 1 ; 明俊超 1 ; 梁政远 1 ; 袁新华 1 ;
作者机构： 1.南京农业大学无锡渔业学院
2.中国水产科学研究院淡水渔业研究中心农业部淡水鱼类遗传育种和养殖生物学重点开放实验室
关键词： 鲤;TRAP标记;体系;优化
期刊名称： 动物学杂志
ISSN： 0250-3263
年卷期： 2010 年 45 卷 03 期
页码： 74-80
收录情况： 北大核心 ; CSCD
摘要： 针对鲤(Cyprinus carpio)这一主要水产养殖品种设计了靶位区域扩增多态性(target region amplified polymorphism,TRAP)分子标记的反应体系,对影响TRAP反应体系的各参数,包括Mg2+、dNTPs、TaqDNA聚合酶、模板DNA和引物浓度进行了优化,建立了适合鲤的、稳定、可重复的TRAP-PCR反应体系。在15μlPCR反应体系中,Mg2+浓度为1.5mmol/L、dNTPs浓度为0.35mmol/L、两个随机引物浓度均为3pmol/L、固定引物浓度为10pmol/L、含DNA模板60ng、TaqDNA聚合酶1.0U。鲤的TRAP反应程序为:94℃4min,1个循环;94℃45s,35℃45s,72℃1min,5个循环;94℃45s,53℃45s,72℃1min,35个循环;72℃10min,1个循环。这一优化体系的建立为今后进行鲤群体遗传多样性、种质鉴定、遗传连锁图谱及亲缘关系分析等方面的研究提供了新的分子标记。
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