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木糖异构酶基因xylA的克隆及其表达载体的构建

文献类型： 中文期刊

作者： 孙磊 1 ; 张国军 1 ; 闫爱玲 1 ; 徐海英 1 ;

作者机构： 1.北京市农林科学院林业果树研究所

关键词： 木糖异构酶基因;标记基因;植物表达载体;克隆

期刊名称： 生物技术通报

ISSN： 1002-5464

年卷期： 2011 年 0 卷 07 期

页码： 167-170

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 木糖异构酶基因xylA是一种正向选择标记基因,在植物基因工程中使用该标记可以获得安全的转基因植物。构建了以xylA基因为选择标记的植物表达载体。从大肠杆菌Top10中扩增出xylA基因,插入到质粒pCAMBIA2301的XhoI位点,通过酶切和PCR检测插入片段的正确性,得到载体pCAMBIA2301-xylA,将pBI121载体上的‘35S-GUS-Nos’表达框插入到pCAMBIA2301-xylA的EcoR I和Hind III位点。得到中间载体pCAMBIA2301-xylA-GUS,用SacI和SmaI切下克隆载体上的CBF1基因替代pCAMBIA2301-xylA-GUS中的GUS片段,用电转化法将获得的表达载体转化到农杆菌中,为将来获得安全的转基因抗寒植株奠定基础。

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