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新疆哈密瓜SRAP反应体系建立和优化

文献类型： 中文期刊

作者： 季娟 1 ; 张学军 2 ; 伊鸿平 3 ;

作者机构： 1.新疆农业科学院哈密瓜研究中心

2.新疆农业大学农学院

3.海南省甜瓜西瓜遗传育种重点实验室

关键词： 均匀设计;哈密瓜;SRAP-PCR反应;优化体系

期刊名称： 新疆农业科学

ISSN： 1001-4330

年卷期： 2012 年 49 卷 05 期

页码： 837-841

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 【目的】研究新疆哈密瓜SRAP反应的最佳体系,为进一步研究新疆哈密瓜分子标记辅助育种提供基础。【方法】采用均匀实验设计法对新疆哈密瓜SRAP-PCR反应体系的5个主要因子进行优化。【结果】优化后的SRAP-PCR反应体系扩增多态性高、带型清晰、稳定性好,是新疆哈密瓜SRAP扩增的最佳条件。利用该优化体系,对12个新疆哈密瓜地方品种基因组DNA进行SRAP扩增,大部分材料扩增出来的带清晰可辨、条带丰富、背景无干扰,满足分子标记应用的要求。【结论】20μL的反应体系中各成分用量或浓度为:模板DNA 36 ng、Taq DNA聚合酶2.5 U、dNTPs 2.25 mmol/L、引物0.6μmol/L、Mg2+1.75 mmol/L和2μL 10×PCR buffer。

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