文献类型： 中文期刊

作者： 黄炜莉 ¹ ; 刘含梅 ¹ ; 唐雨婷 ¹ ; 张世凤 ¹ ; 钟发刚 ² ; 张鹭 ¹ ;

作者机构： 1.复旦大学生命科学学院微生物系

2.新疆农垦科学院

关键词： 海分枝杆菌;斑马鱼;sRNA;靶标基因

期刊名称： 现代生物医学进展

ISSN： 1673-6273

年卷期： 2024 年 24 卷 019 期

页码： 3601-3608,3688

摘要： 目的：鉴定海分枝杆菌（Mycobacterium marinum）中s RNA5.85的存在，探究s RNA5.85对分枝杆菌的生理影响及调控机制。方法：Northern-blot验证分枝杆菌中s RNA5.85的存在后，利用pMV261质粒，构建s RNA5.85过表达重组海分枝杆菌（5.85-OE株），观察重组菌株在体外生长、滑动能力及菌落形态变化。通过人源巨噬细胞感染模型，评估重组菌株的入胞及胞内增殖能力，LDH检测感染后的细胞活力。利用斑马鱼感染模型，验证s RNA5.85对细菌毒力的影响。结合targetRNA2与IntaRNA预测工具，预测s RNA5.85的潜在靶标及互作位点，并使用qRT-PCR验证。结果：海分枝杆菌基因组中存在s RNA5.85。过表达s RNA5.85不改变重组菌株的体外生长、滑动能力和菌落形态；5.85-OE株感染巨噬细胞48 h后，不影响THP-1的细胞活力，细菌胞内增殖能力与野生型无显著差异；s RNA5.85过表达会提高海分枝杆菌长期感染过程中，在斑马鱼体内的载菌量。targetRNA2预测的4个潜在靶基因MMAR＿3476、MMAR＿4052、MMAR＿3482、MMAR＿2920的转录水平随s RNA5.85过表达而显著上调，MMAR＿3476及MMAR＿4052共享同样的与s RNA5.85的互作位点。结论：s RNA5.85可通过调控低氧响应相关基因的表达，提高长期感染过程中对斑马鱼的毒力。本研究为致病性分枝杆菌中s RNA的挖掘和功能解析提供了重要线索。