文献类型： 中文期刊

作者： 刘筱筱 ¹ ; 余秋蓉 ¹ ; 李霞 ² ; 毛立 ² ; 许信刚 ¹ ; 李彬 ² ;

作者机构： 1.西北农林科技大学动物医学院

2.江苏省农业科学院兽医研究所

关键词： 牛冠状病毒;多克隆抗体;双抗体夹心ELISA;鉴定

期刊名称： 中国兽医科学

ISSN： 1673-4696

年卷期： 2025 年 55 卷 010 期

页码： 1334-1340

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 不断发现的新型冠状病毒对人类的危害极其严重,牛冠状病毒(bovine coronavirus,BCoV)具有致人畜共患病的潜力,而BCoV分离鉴定及病原检测均缺乏有效的方法.本研究制备与BCoV发生特异性反应的家兔多克隆抗体,为BCoV的检测和鉴定奠定技术基础.本研究将BCoV灭活后免疫家兔制备针对病毒的多克隆抗体.经3次免疫后检测血清中和效价,将纯化后的多克隆抗体用于间接免疫荧光(IFA)、免疫印迹(Western-blot)和夹心ELISA试验.结果显示,制备的家兔多克隆抗体与BCoV反应,血清中和效价可达到1∶28,与羊冠状病毒(cpCoV)反应,可达1∶29.经IFA鉴定,该多克隆抗体能够与不同毒株的BCoV和cpCoV发生特异性反应;Western-blot分析发现在约50kDa处出现特异性条带;将家兔多克隆抗体作为夹心ELISA的包被抗体,只与BCoV和cpCoV发生特异性反应,而不与其他病毒发生交叉反应.该多克隆抗体与不同毒株的BCoV和cpCoV特异性结合,可用于分离鉴定BCoV和cpCoV的IFA和Western-blot分析,制备的多克隆抗体还可作为包被抗体用于检测BCoV与cpCoV的双抗夹心ELISA.本研究为BCoV与cpCoV的病原检测与流行病学调查奠定了基础.