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利用CR-RT-PCR技术克隆大葱线粒体cob基因

文献类型： 中文期刊

作者： 张丹丹 1 ; 刘倩纯 2 ; 赵泓 3 ; 温常龙 4 ; 王永勤 5 ;

作者机构： 1.沈阳农业大学

2.湖南农业大学园艺园林学院北京农林科学院蔬菜研究中心/农业部华北地区园艺作物生物学与种质创制重点实验室

3.沈阳农业大学园艺学院北京市农林科学院蔬菜研究中心农业部华北地区园艺作物生物学与种质创制重点实验室蔬菜种质改良北京市重点实验室

4.北京市农林科学院蔬菜研究中心农业部都市农业(北方)重点实验室

5.北京市农林科学院北京农业生物技术研究中心

关键词： 葱;线粒体;CR-RT-PCR

期刊名称： 分子植物育种

ISSN： 1672-416X

年卷期： 2016 年 12 期

页码： 3308-3314

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 本研究以大葱花蕾为材料,对环化RNA反转录聚合酶链式反应(CR-RT-PCR)技术在RNA反应时间和试剂添加上进行了优化,并用优化后的技术对大葱线粒体cob基因的全长进行了扩增。在本实验条件下,最优环化反应条件为:RNA首先65℃反应5 min,加入反应试剂后15℃反应2 h,最后70℃反应10 min使酶失活,反应体系中不必添加催化剂PEG6000。实验结果表明,cob基因全长为1 522 bp,无poly(A)尾,包含完整的N端和C端,共编码397个氨基酸。系统进化树分析显示大葱cob基因与同属的洋葱同源性最高,且与其他单子叶植物聚为一类。研究表明此技术获得的线粒体cob基因信息完整,可进行后续功能研究。

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[2]氧化应激对母畜卵巢功能影响的研究进展. 孟亚轩,刘彦,王晶,陈国顺,冯涛. 2024

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