文献类型： 中文期刊

作者： 董文宇 ¹ ; 刘维龙 ¹ ; 胡波 ² ; 范志宇 ¹ ; 魏后军 ² ; 仇汝龙 ² ; 宋艳华 ² ; 陈萌萌 ² ; 葛雷 ² ; 熊富强 ¹ ; 王芳 ² ;

作者机构： 1.西藏农牧学院

2.江苏省农业科学院兽医研究所农业部兽用生物制品工程重点实验室

关键词： 兔出血症病毒;VP60蛋白;HBGAs;病毒样颗粒;免疫原性

期刊名称： 江苏农业科学

ISSN： 1002-1302

年卷期： 2024 年 012 期

页码： 183-187

收录情况： 北大核心

摘要： 将HBGAs受体结合表位插入兔出血症病毒(RHDV)衣壳蛋白VP60的N端，分析嵌合VP60蛋白的表达及病毒样颗粒(VLPs)形成情况，并研究N端HBGAs受体结合表位的插入对嵌合VP60蛋白免疫原性的影响。通过VP60蛋白N端起始位点HBGAs受体结合表位的插入，获得表位插入的VP60基因。利用Bac-to-Bac系统构建杆状病毒重组质粒，命名为Bacmid-VP60-CR,转染Sf9昆虫细胞后，得到重组杆状病毒rBac-VP60-CR,经HA、IFA和Western Blot鉴定，结果显示，重组蛋白VP60-CR在Sf 9昆虫细胞中得到高效表达，电镜观察显示其可形成与VP60类似的VLPs结构。将重组蛋白免疫2月龄RHDV血清阴性的新西兰兔，200μg/只，免疫后每周采血检测HBGAs表位抗体水平，同时在免疫后14 d,以RHDV WF株攻毒观察VP60-CR重组蛋白的免疫保护效果。结果显示，与VP60对照相比，VP60-CR蛋白可产生更高水平的针对HBGAs表位的抗体水平，且VP60-CR免疫兔可完全抵抗RHDV强毒的攻击。本研究构建了一种N端插入HBGAs受体结合表位的嵌合VP60蛋白，为研究高免疫原性兔出血症基因工程疫苗抗原奠定了基础。