文献类型: 中文期刊
作者: 陆绍红 1 ; 陈睿 1 ; 楼涤 1 ; 张乐 1 ; 张雪娟 2 ;
作者机构: 1.浙江省医学科学院寄生虫病研究所
2.浙江省农业科学院畜牧兽医研究所
关键词: 伊氏锥虫;直接PCR;动基体DNA(kDNA);血液
期刊名称: 寄生虫与医学昆虫学报
ISSN: 1005-0507
年卷期: 2006 年 13 卷 04 期
页码: 204-207
摘要: 为建立伊氏锥虫动基体DNA(KinetoplastDNA,kDNA)的PCR扩增技术,血液直接PCR法检测伊氏锥虫的感染,本文以伊氏锥虫kDNA片段为靶扩增DNA设计引物,确定最适PCR反应条件,建立kDNA片段的PCR扩增技术,应用直接扩增缓冲液(Ampdirect)从感染小鼠的滤纸血标本直接PCR检测伊氏锥虫。结果发现,PCR扩增伊氏锥虫kDNA片段分子量为364bp,能检测的最小DNA量是0·06pg,与布氏锥虫、活动锥虫没有交叉反应。应用直接扩增缓冲液不需进行样本的DNA抽提,直接PCR能检测感染小鼠的早期滤纸血样本,敏感性高于镜检法。本实验建立的直接PCR法检测伊氏锥虫具有较高的敏感性和特异性,方法快捷,可进一步应用于伊氏锥虫病的早期诊断以及现场调查。
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