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鲤鱼cDNA-AFLP技术反应体系的建立

文献类型： 中文期刊

作者： 李飞 1 ; 贾智英 1 ; 闵霞 1 ; 石连玉 1 ;

作者机构： 1.上海海洋大学水产与生命学院

关键词： cDNA-AFLP;鲤鱼;反应体系;水产动物

期刊名称： 基因组学与应用生物学

ISSN： 1674-568X

年卷期： 2011 年 30 卷 01 期

页码： 122-128

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 将cDNA扩增片段长度多态性(cDNA-amplified fragment length polymorphism)技术应用在鲤鱼基因的转录表达研究中,本文通过对cDNA-AFLP主要步骤的优化和改进,建立起鲤鱼cDNA-AFLP反应体系。结果表明,采用MseⅠ和BstYⅠ酶切鲤鱼cDNA100ng,分别处理2h和3h后,以接头浓度分别为2pmol/μL和0.2pmol/μL、T4连接酶浓度为0.12U/μL的反应体系进行连接。以稀释50倍的预扩增产物为模板、BstYⅠ和MseⅠ比例为1:4的引物配比进行选择扩增可得到稳定的扩增结果。本研究建立的cDNA-AFLP技术将为鲤鱼转录组研究建立基础和技术支持。

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