文献类型： 中文期刊

作者： 熊冬琴 ¹ ; 黄子栋 ¹ ; 彭琦 ¹ ; 张维 ¹ ; 张洁夫 ¹ ; 浦惠明 ¹ ; 陈松 ¹ ;

作者机构： 1.江苏省农业科学院经济作物研究所;农业部长江下游棉花与油菜重点实验室;江苏农林职业技术学院;江苏省现代作物生产协同创新中心

关键词： 甘蓝型油菜;BnALS基因启动子;基因克隆;瞬时表达;验证启动子活性

期刊名称： 江苏农业科学

ISSN： 1002-1302

年卷期： 2018 年 23 期

页码： 60-65

摘要： 为研究油菜ASL基因(BnALS)启动子的功能,根据油菜基因组信息,提取得到BnASL基因上游区域的碱基序列,通过设计特异性引物对,利用PCR扩增克隆得到大小为1 048个碱基的片段。序列分析结果显示,该序列富含TATA box和CAAT box等启动子核心调控序列,并有多个与逆境、激素、光响应等表达相关的顺式作用元件,如MBS元件、ABRE元件、HSE元件CGTCA-motif、TGA-motif等。为了进一步研究其启动子功能,将其与β-葡萄糖苷酸酶(GUS)基因融合,构建了植物表达载体p1304-P,通过根癌农杆菌介导法转化烟草(Nicotiana benthamiana),对PCR阳性的再生烟草苗进行GUS组化分析,检测GUS基因在转基因烟草中的瞬时表达情况。结果表明,克隆的BnASL基因上游序列能够驱动GUS基因在烟草根、茎、叶等组织中的表达,推测油菜ALS基因上游的1 048 bp片段具有组成型表达的启动子功能。