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番木瓜环斑病毒海南株系植物RNAi表达载体的构建

文献类型: 中文期刊

作者: 赵辉 1 ; 张雨良 2 ; 孔华 2 ; 贾瑞宗 2 ; 朱芸 3 ; 郭安平 2 ; 曾会才 2 ; 彭明 2 ;

作者机构: 1.海南大学农学院

2.中国热带农业科学院热带生物技术研究所

3.夏威夷农业研究中心

关键词: 番木瓜;番木瓜环斑病毒;RNA沉默;基因转化

期刊名称: 热带作物学报

ISSN: 1000-2561

年卷期: 2015 年 36 卷 12 期

页码: 2210-2215

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 为研究广谱抗环斑病毒(PRSV)海南株系转基因番木瓜育种方案,采集海南番木瓜各主要种植区的PRSV株系,以外壳蛋白(CP)、辅助成分-蛋白酶(HC-Pro)和复制酶(Nib)基因作为靶标基因,通过序列比对和运用Clustalx软件分析,得到干扰基因的保守区域和挑选出海南PRSV典型株系的代表样品。以p UCCRNAi为骨架质粒,利用代表样品的CP、NIb、Hc-Pro基因片断保守序列构建RNAi发夹结构,将发夹结构导入p CAMBIA2300-35S-OCS植物表达载体,构建出抗PRSV植物表达载体p CAMBIA2300-35S-CP-RNAi-OCS、p CAMBIA230035S-Hc-Pro-RNAi-OCS、p CAMBIA2300-35S-NIb-RNAi-OCS。实验将PRSV不同株系保守序列的分析与RNAi的高效抗病设计理念相结合,可用于创造高效、广谱抗PRSV病毒病的新种质。

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