文献类型： 中文期刊
作者： 蔡勤安 1 ; 尚丽霞 2 ; 姜志磊 2 ; 于志晶 2 ; 马瑞 3 ;
作者机构： 1.吉林省农业科学院农业生物技术研究所
2.;吉林省农业科学院农业生物技术研究所
3.;吉林省农业科学院农业生物技术研究所;
关键词： 大豆;转基因;侧翼序列分析
期刊名称： 大豆科学
ISSN： 1000-9841
年卷期： 2018 年 01 期
页码： 32-38
收录情况： 北大核心 ; CSCD
摘要： 为方便HAL1转基因大豆的研究和检测,以转HAL1基因大豆T3代基因组DNA为模板,使用热不对称交错PCR(TAIL-PCR)方法分离其外源基因插入位点的侧翼序列,获得了插入片段DNA序列(T-DNA)的左翼序列和右翼序列。通过比对大豆基因组序列确定其整合位点,确定了HAL1基因的T-DNA在大豆基因组1号染色体非编码区49468395位点以单拷贝插入,转基因事件不影响大豆基因组功能基因的正常表达,而且在200 mmol·L~(-1)NaCl盐胁迫下转基因植株生长力明显强于对照材料。蛋白定量检测结果表明,在叶片中蛋白含量最高可达0.03 mg·g~(-1),在根茎花中也有表达,但是含量较低。根据整合位点处的左右侧翼序列设计两对特异性PCR检测引物,PCR检测结果显示只有转HAL1基因大豆阳性材料才能扩增出926和816 bp DNA片段。本研究建立的转HAL1基因大豆特异性定性检测方法,对转基因大豆的研究具有重要的意义,也为大豆转基因受体材料的管理与检测提供参考。
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