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鲤疱疹病毒Ⅱ型(CyHV-2) ORF25蛋白的原核表达及单克隆抗体的制备

文献类型: 中文期刊

作者: 彭俊杰 1 ; 张琪 1 ; 贾路路 1 ; 林蠡 1 ; 袁军法 1 ; 曾令兵 2 ; 周勇 2 ; 刘学芹 1 ;

作者机构: 1.华中农业大学水产学院/淡水水产健康养殖湖北省协同创新中心

2.中国水产科学研究院长江水产研究所

关键词: 鲤疱疹病毒Ⅱ型;ORF25蛋白;原核表达;单克隆抗体

期刊名称: 华中农业大学学报

ISSN: 1000-2421

年卷期: 2017 年 36 卷 02 期

页码: 96-101

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 利用PCR方法扩增鲤疱疹病毒Ⅱ型(CyHV-2)ORF25基因的部分基因序列,并将扩增产物连接到原核表达载体pGEX-KG,成功构建了CyHV-2-ORF25-KG重组质粒。IPTG将其诱导后,SDS-PAGE分析表明:目的蛋白得到表达,分子质量大小为42ku,且主要以包涵体形式存在;用纯化的融合蛋白免疫BALB/c小鼠,多次免疫后通过细胞融合,筛选出1株单抗5C6;经间接免疫荧光试验和Western blot试验验证,这株单抗可以识别CyHV-2ORF25蛋白。

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