文献类型: 中文期刊
作者: 张煜星 1 ; 武寒雪 2 ; 祝建波 2 ; 刘焕 2 ; 周鹏 1 ;
作者机构: 1.海南大学农学院
2.石河子大学生命科学学院农业生物技术重点实验室
关键词: 铜绿假单胞菌;脂肪酶;原核表达
期刊名称: 安徽农业科学
ISSN: 0517-6611
年卷期: 2008 年 36 卷 35 期
页码: 15384-15385+15388
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: [目的]对铜绿假单胞菌脂肪酶Lipase基因进行原核表达。[方法]利用PCR方法从铜绿假单胞菌基因组DNA中扩增得到脂肪酶基因,测定其核苷酸序列,利用基因重组技术构建脂肪酶基因的原核表达载体,加IPTG至终浓度为1.0 mmol/L诱导蛋白表达4 h,并进行SDS-PAGE电泳。[结果]从铜绿假单胞菌中克隆的脂肪酶基因成熟肽的序列,与NCBI上所递交的铜绿假单胞菌脂肪酶序列同源性很高,达99.36%。成功构建了脂肪酶基因的原核表达载体pET32a-Lip,进一步SDS-PAGE电泳结果显示目的基因得到高效表达。[结论]克隆的铜绿假单胞菌脂肪酶带有自身的信号肽,也可以在大肠杆菌中正常表达,可以用于进一步的研究。
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