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黄瓜绿斑驳花叶病毒MP基因的原核表达及抗血清制备

文献类型: 中文期刊

作者: 任春梅 1 ; 程兆榜 1 ; 杨柳 1 ; 李硕 1 ; 王海涛 1 ; 陆芳 1 ; 季英华 1 ;

作者机构: 1.江苏省农业科学院植物保护研究所

关键词: 黄瓜绿斑驳花叶病毒;运动蛋白;原核表达;抗血清

期刊名称: 热带作物学报

ISSN: 1000-2561

年卷期: 2025 年 46 卷 009 期

页码: 2181-2189

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 黄瓜绿斑驳花叶病毒(Cucumber green mottle mosaic virus, CGMMV)是危害瓜类作物的重要植物病毒之一,其运动蛋白(movement protein, MP)在病毒传播和致病过程中起关键作用。本研究通过RT-PCR克隆CGMMV的MP基因,构建原核表达载体pET-32a-MP,并在大肠杆菌BL21(DE3)中成功诱导表达分子量约48 kDa的重组MP融合蛋白。利用镍柱亲和层析纯化获得高纯度蛋白(纯度≥80%),以此免疫新西南大白兔制备多克隆抗体。Western blot和ELISA分析表明,抗血清效价达409 600,且能特异性识别CGMMV侵染叶片中的MP蛋白,与烟草花叶病毒(Tobacco mosaic virus,TMV)、西瓜花叶病毒(Watermelon mosaic virus,WMV)等其他病毒无交叉反应。本研究实现了CGMMV MP蛋白的原核高效表达与特异性抗体制备,为病毒快速检测、免疫组织化学及蛋白功能研究提供重要工具,对保障瓜类作物安全生产具有重要意义。

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