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大丽轮枝菌菌核型菌株T-DNA插入突变体库的构建及微菌核发育异常突变体的筛选

文献类型： 中文期刊

作者： 梁曼 1 ; 邓晟 2 ; 张昕 2 ; 林玲 2 ;

作者机构： 1.南京师范大学生命科学学院

2.江苏省农业科学院植物保护研究所

关键词： 农杆菌介导的转化;大丽轮枝菌;突变体库;微菌核

期刊名称： 江苏农业学报

ISSN： 1000-4440

年卷期： 2015 年 03 期

页码： 520-525

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为阐明大丽轮枝菌微菌核形成发育的分子机理,利用农杆菌介导的遗传转化方法,建立了包含2 000个转化子的大丽轮枝菌菌核型菌株V08DF1的T-DNA插入突变体库,并在查氏、查氏-根或PDA培养基上培养,观察各转化子的菌落形态。从中筛选出130个菌落特征与野生型菌株V08DF1有明显差异的突变体菌株,其中14个突变体菌株为微菌核发育受阻。对这14个微菌核发育异常的突变体菌株进行T-DNA插入的PCR验证,均能扩增到潮霉素抗性基因,Southern杂交显示其中7个为单拷贝插入,5个为双拷贝插入,2个为三拷贝插入,表明T-DNA已经成功整合到这些突变株的基因组DNA中。

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